基因擴增PCR可以是分散形式,也可以是組合形式。完成一組PCR實(shí)驗,通常應經(jīng)過(guò)試劑配制、樣品處理、核酸擴增及產(chǎn)物分析四個(gè)實(shí)驗過(guò)程,若實(shí)驗工藝需要,還應增加樣品粉碎過(guò)程。
基因擴增PCR規范的操作:
(1)臨床基因擴增檢驗實(shí)驗室的技術(shù)人員必須進(jìn)行上崗培訓,經(jīng)培訓合格后才能從事臨床基因擴增檢驗的工作;
(2)在實(shí)驗操作過(guò)程中,操作者必須戴手套,并經(jīng)常更換。此外,操作中使用一次性帽子也是一個(gè)有效地防止污染的措施;
(3)清潔工作及時(shí)、正確。實(shí)驗工作結束后,必須立即對本區進(jìn)行清潔。除常規的消毒液體對表面進(jìn)行擦拭消毒或紫外線(xiàn)燈的照射消毒外,對一些實(shí)驗設備還應進(jìn)行高壓消毒處理。
基因擴增PCR的日常維護保養工作:
1、樣品池的清洗
先打開(kāi)蓋子,然后用95%乙醇或10%清洗液浸泡樣品池5min,然后清洗被污染的孔;用微量移液器吸取液體,用棉簽吸干剩余液體,設定保持溫度為50℃的PCR程序并使之運行,讓殘余液體揮發(fā)去除,一般5~10min即可。
2、熱蓋的清洗
對于熒光定量基因擴增儀,當有熒光污染出現,而且這一污染并非來(lái)自樣品池時(shí),或當有污染或殘跡物影響到熱蓋的松緊時(shí),需要用壓縮空氣或純水清洗墊蓋底面,確保樣品池的孔干凈,無(wú)污物阻擋光路。
3、儀器外表面的清洗
清洗JS-G基因擴增儀的外表面可以除去灰塵和油脂,但達不到消毒的效果,選擇沒(méi)有腐蝕性的清洗劑對基因擴增儀的外表面進(jìn)行清洗。
4、更換保險絲
先將基因擴增儀關(guān)機,拔去插頭,打開(kāi)電源插口旁邊的保險盒,換上備用的保險絲,觀(guān)察是否恢復正常。